摘   要：奶牛乳房炎是由病原微生物感染引起并以奶牛乳房發(fā)生炎癥變化為主的一種疾病。本文通過采集嘉立荷牧場奶樣進行乳房炎病原菌檢測，依據(jù)檢測結果建立了針對性的治療及預防方案，為降低乳房炎發(fā)病率提供保障。
關鍵詞：奶牛；乳房炎；病原菌
奶牛乳房炎是世界上奶牛較常見也是造成經(jīng)濟損失較大的一種疾病，主要致病因素是細菌和其他微生物感染。因此，如何及時、準確的了解感染原因，據(jù)此做出合理治療和預防是提高治愈率和降低發(fā)病率的有效手段。但傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)法鑒別種類少、耗時長、專業(yè)性強嚴重制約其在實際生產中的應用。
近年來，隨著分子生物學技術在畜牧的應用日趨成熟，生物芯片和LAMP有機結合的基因芯片技術有效的解決了這一難題。
本文結合奶牛場體細胞和隱性乳房炎的評定數(shù)據(jù)，利用基因芯片技術提高奶牛乳房炎的檢測效率的優(yōu)勢設定乳房炎管理目標，針對性建立奶牛乳房健康評估體系，為降低乳房炎發(fā)病率提供保障。
1   材料與方法
1.1   樣品來源
健康上市奶樣品（大罐奶樣品）每月2次，每月檢測28例；
臨床型乳房炎或含有臨床型乳房炎牛只的混合奶樣品（小罐奶樣品）每月2次，共計28例；
乳房炎牛的單個樣品（個體樣品），每個奶牛場3-5個，約60例。
1.2   樣品收集
奶樣采集前應選用無菌、干凈、密封的采血管、非抗凝離心管或純凈水瓶（使用前將水倒掉），采集時應嚴格按照擠奶程序，采集棄掉前三把奶后的乳汁3ml；自然脫杯后再采集3ml乳汁，與前者混合，采集好的牛奶樣品加入1-2滴重鉻酸鉀溶液，冰箱冷藏保存較多20天。
1.3   檢測方法
使用奶牛乳房炎病原體檢測試劑盒，采用恒溫擴增微流控分析儀進行檢測。
2   結果與分析
嘉立荷牧場引起乳房炎發(fā)病的致病菌情況如圖所示，結果顯示：上市奶樣中引起乳房炎的主要致病菌為乳房鏈球菌、無乳鏈球菌及牛棒狀桿菌，臨床奶樣中引起乳房炎的主要致病菌是支原體、牛棒狀桿菌及無乳鏈球菌。
針對常見引起奶牛乳房炎的16種致病微生物建立了3套有針對性的治療和預防方案。
方案一：革蘭氏陽性菌高效抗生素治療方案，根據(jù)基因芯片鑒定結果，選擇高效的抗生素加以治療，可以使患病牛只較短時間達到細菌學治愈，減少了短期內復發(fā)情況的發(fā)生。
方案二：革蘭氏陰性菌非抗生素治療方案，針對鑒定結果為革蘭氏陰性菌的乳房炎病例，治療過程中不使用任何抗生素僅采用抗炎等支持療法即可治愈，不采用抗生素治療，既減低了治療過程中的治療費用又降低了耐藥菌株的產生。
方案三：金黃色葡萄球菌和支原體的淘汰凈化方案。鑒定為金黃色葡萄球菌和支原體的乳房炎病例一律淘汰，既節(jié)省了治療費用又避免了牛群中傳染源的存在。
3   討論
大罐奶檢測結果結合奶牛場體細胞水平和乳房炎發(fā)病率，可以宏觀上評估整個泌乳牛群的乳房健康狀況和潛在風險因素：連續(xù)3個月，體細胞數(shù)較高，大罐奶檢測到支原體的存在，且臨床型乳房炎以支原體為主導，需要對泌乳牛群做支原體排查、凈化。如果檢測到其他類型的細菌存在，且引起臨床型乳房炎的細菌類型以該大罐奶檢測到的細菌一致，同時結合乳房炎發(fā)病率對擠奶環(huán)節(jié)或者環(huán)境衛(wèi)生情況等作出評估。
小罐奶的檢測結果能有效判斷出一段時間內引起該奶牛場臨床乳房的主導細菌，找到致病因素。對整個泌乳牛群感染風險起到向導作用；找到引起乳房炎發(fā)病的主要致病菌并分析原因。
個體樣品能直觀體現(xiàn)每個奶牛個體的致病菌，3-5個個體樣品的檢測結果對比與小罐奶和大罐奶以及體細胞和發(fā)病率的有機結合能夠全面的評估整個泌乳牛群的乳房健康狀況和潛在風險因素。同時，個提樣品檢測結果在一定程度上對于治療有一定的指導意義。
目前，基因芯片技術的應用，顯著提高了奶牛乳房炎的檢測效率優(yōu)勢。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法相比基因芯片技術鑒定病原菌時間顯著縮短，由原來的24-72h縮短到1h，短時間之內提供較佳的治療方案，顯著提高治愈率，特別是革蘭氏陽性菌群，治愈率可以接近90%。另一方面基因芯片檢測技術包含16種常乳房炎致病菌，與傳統(tǒng)方法的3-4種相比優(yōu)勢非常明顯。